مطالعهی اتصال به DNA در سه رنگ غذای رایج :آزوروبین، سانست یلو و کینولین یلو
First Statement of Responsibility
/میترا آروین
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
: دانشکده علوم طبیعی
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۰
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۸۲ص
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
زیست شناسی - بیوشیمی
Date of degree
۱۳۹۰/۱۰/۲۶
Body granting the degree
دانشگاه تبریز
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
داکسی ریبونوکلئیک اسید نقش بسیار مهمی را در حیات ایفا می کند .در سالصهای اخیر، مطالعه ی ساختار، اتصالات اختصاصی، مکانیسم و دینامیک میانکنش مولکولهای کوچک با مارپیچ دو رشتهDNA ، توجهات روزافزونی را به خود جلب کرده است، دلیل این امر این است که این میانکنش ها ممکن است رونویسی و ترجمه DNA در محیط درون بدن را تحت تأثیر قرار دهند و یا باعت جهش در ژن ها گردند که این موارد میتواند منشأ بعضی از بیماری ها گردد .مطالعاتی در زمینه ی جهش زایی یا تخریب ژنتیکی در ارتباط با مولکولهای کوچک از جمله آفت کش ها یا افزودنی های غذایی از طریق میانکنش با DNA در محیط آزمایشگاه صورت گرفته است .در این مطالعه ما به بررسی میانکنش سه افزودنی غذایی رایج به نام های آزوروبین، سانست یلو و کینولین یلو با DNA پرداختهصایم .این ترکیبات به عنوان رنگ-کننده ی غذایی در بعضی از کشورها از جمله ایران استفاده میشوند .مطالعات صورت گرفته نشان داده است که این سه رنگ غذایی ممکن است دارای اثرات مخربی در بدن باشند .ما به بررسی امکان اتصال این سه رنگ غذایی با DNA پرداختیم که دریافت بهتری از مکانیسم اتصال و اثرات این ترکیبات روی ساختار دوم DNA بدست میدهد .در این راستا از تکنیک های طیف سنجی از جمله طیف سنجی ماوراءبنفش-مرئی، فلورسانس و دورنگ نمایی دورانی، اندازه گیری ولتامتری چرخه ای و ویسکوزیمتری جهت تخمین حالت اتصالی اصلی و ثابت اتصال این رنگ ها با DNA استفاده شد .طیف جذبی ماوراء بنفش-مرئی هر سه ترکیب هایپوکرومیسیتی را در حضور DNA نشان داد .در حالی که با اضافه کردن آزوروبین و کینولین یلو به DNA طیف جذبی آن کاهش می یابد .بعلاوه توسط تیتراسیون جذبی ثابت اتصال آزوروبین، سانست یلو و کینولین یلو به ترتیب۱۰۴ ۲/۶،۱۰۴ ۰/۷و۱۰۳ ۴/۵بر مولار تخمین زده شد .طیف فلورسانس آزوروبین با اضافه کردن DNA دچار خاموش سازی شد و مطالعات اتصال رقابتی توسط قرمز خنثی در اتصال به DNA نشان داد که کینولین یلو به وسیله رقابت با قرمز خنثی موجود در سیستم قرمز خنثی- DNAبا DNA میانکنش می کند این در حالی است که سانست یلو تنها میتواند موجب رهایی مقادیری از مولکولهای قرمز خنثی گردد .روش ولتامتری چرخه ای نشان داد که جریان پیک آندی و کاتدی مربوط به آزوروبین و کینولین یلو با اضافه کردن DNA کاهش می یابد .طیف دورنگ نمایی دورانی DNA در اتصال به آزوروبین تغییرات کونفورماسیونی مشخصی مانند تبدیل فرمDNA - Bبه فرمDNA - Aرا به نمایش گذاشت در حالی که کینولین یلو و سانست یلو موجب پایدارتر شدن فرم راستصگردDNA - Bمیشوند .گرانروی DNA در حضور هر سه ترکیب تغیرات ناچیزی را نشان میدهد .تمامی نتایج نشان میدهد که آزوروبین و سانست یلو از طریق اتصالات خارجی و به احتمال زیاد از طریق اتصال به شیار و کینولین یلو از طریق اتصال به شیار و درج شوندگی جزئی به DNA متصل میصگردند
Text of Note
Deoxyribonucleic acid plays a vital role in the life. In recent year; studies of the structure, binding specificity, mechanism and dynamics of the interactions of small molecules with double helical DNA have attracted continuous interest, because these interactions may influence replication and transcription of DNA in vivo, or may cause gene mutation which are the origin of some diseases. There are a few in vitro studies focusing on the investigation of genotoxicity and genetic damage via the interaction of small molecules like pesticides and food additives with DNA. In this study we investigate, interaction between DNA and three famous food additives, azorubine, sunset yellow and quinoline yellow, which are used as coloring substance in some country such as Iran. Some studies revealed that this three food colorant may have a adverse effect on the body. We try to demonstrate that if this componants have a potential to make an interaction with DNA and give the best of understanding the mechanism of food colourant DNA binding and its effect on DNA secondary structure in a systematic manner. Thus, som spectroscopic techniques such as UV-vis, fluorescence and circular dichroism spectroscopy, cyclic voltammetry and viscosity measurement have been employed for analyzing the in vitro interaction of the colours with CT-DNA. The major binding mode and binding constant of the colours to DNA was also estimated. UV-vis absorption band of all of the colours showed hyperchromisity in the presence of DNA while upon addition of azorubine and quinoline yellow, UV-vis absorption band of DNA was decreased. The binding constants (Kb) for azorubine, sunset yellow and quinoline yellow with DNA was estimated to be 6.2 104, 7 104 and 5.4 103 M-1 respectively through spectroscopic titrations. The fluorescence of azorubine quenched with the addition of DNA and competitive binding studies using neutral red (NR) bound to DNA have shown that quinoline yellow interact with DNA by, releasing NR molecules from NR-DNA system, while sunset yellow just can release some of the NR molecules. The cyclic voltammetry method showed that both anodic and cathodic peak currents of azorubine and quinoline yellow decreased upon addition of DNA. Circular dichroism spectra indicated that azorubine can make a certain detectable conformational changes such as conversion from B-like to A-like in the DNA double helix, while quinoline yellow and sunset yellow stabilize a little the right-handed B-form of CT-DNA. All of the colouring reagents induced relatively small changes in the viscosity of DNA. The experimental results suggest that azorubine and sunset yellow binds to DNA via an outside binding mode perhaps from the groves of DNA and quinoline yellow via both partial intercalation and groove binding modes