عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
۹۳۰۰۷پ
فارسی
فارسی
بررسی اثر عصاره آبی بذرکاسنی بر فسفریلاسیون پروتئین های Akt، eNOS و میزان پروتئین ET-1 در پی استرس اکسیداتیو ناشی از پالمیتیک اسید در سلول های اندوتلیال (HUVECs)
[پایان نامه]
راضیه عبدالهی پور حقیقی
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
1396
83ص.
جدول نمودار
سی دی
کارشناسی ارشد
بیوشیمی بالینی
شیوع جهانی چاقی باعث افزایش شیوع و بروز مقاومت به انسولین و عوارض قلبی و عروقی آن شده است. اسیدهای چرب افزایش یافته در خون با افزایش استرس اکسیداتیو منجر به اختلال در مسیر سیگنالینگ انسولین و ایجاد اختلال در عملکرد اندوتلیال می شوند. انسولین علاوه بر نقش مهمی که در تنظیم هموستاز گلوکز ایفا می کند، عملکرد فیزیولوژیکی مهمی در اندوتلیوم عروق انجام می دهد و به هموستاز هماهنگ قلبی و عروقی کمک می کند. انسولین با اتصال به رسپتور خود، مسیر PI3K را فعال و منجر به تولید نیتریک اکساید (گشاد کننده عروقی) می شود و همچنین می تواند با فعال کردن مسیر MAPK، اندوتلین-1(منقبض کننده عروقی) را تولید کند. تعادل این دو مسیر نقش بسیار مهمی در عملکرد اندوتلیال ایفا می کند. مطالعات نشان داده اند که پلی فنول ها به علت خاصیت آنتی اکسیدانی می توانند با کاهش رادیکالهای فعال اکسیژن با مقاومت به انسولین مقابله کنند. مطالعات قبلی انجام شده بر روی عصاره آبی بذر کاسنی (CSE) نشان می دهد که گیاه کاسنی حاوی پلی فنول های شیکوریک اسید، کلروژنیک اسید و کافئیک اسید می باشد و می تواند حساسیت به انسولین را افزایش دهد. از این رو در مطالعه اثر عصاره آبی بذر کاسنی را بر سیگنالینگ انسولین در سلولهای اندوتلیال مورد بررسی قرار داده ایم.روش کار: ابتدا سلول های HUVECs در محیط کشت DMEM کشت داده شدند و سپس توسط تست MTT دوزM µ 100 پالمیتات و چهار دوز 0.625 mg/ml، 1.25 mg/ml، 2.5mg/ml و 5mg/ml عصاره کاسنی برای ادامه کار انتخاب شد. در ادامه میزان ROS در گروه های تیمار شده در مدت زمان های 3، 12 و 24 ساعت با روشهای فلوریمتری و میکروسکوپ فلورسانس اندازه گیری شد. در مرحله ی بعد در محیط سلولهایی که با سه دوز 1.25 mg/ml، 2.5mg/ml، 5mg/ml عصاره کاسنی و غلظتM µ 100 پالمیتات و انسولینnM 100تیمار شده بودند، میزان نیتریک اکساید توسط روش گریس اندازه گیری شد. سپس به منظور بررسی فسفریلاسیون پروتئین های Akt وeNOS در سلولهایی که مشابه قبل تیمار شده اند از روش لکه گذاری وسترن استفاده شد. در مرحله آخر میزان پروتئین اندوتلین-1 توسط تکنیک الیزا اندازه گیری شد.نتایج: پالمیتات به طور معناداری میزان ROS را در مدت زمان های 3،12 و 24 ساعت افزایش داد و CSE در مدت زمان 12 ساعت توانست در هر سه دوز (1.25 mg/ml، 2.5mg/ml و 5mg/ml) میزان ROS افزایش یافته توسط پالمیتات را کاهش دهد. همچنین پالمیتات در زمان های 12 و 24 ساعت میزان نیتریک اکساید را کاهش داده و کاسنی در هر دو زمان توانست میزان آن را افزایش دهد ولی با توجه به این که نسبت NO/ROS که در 12 ساعت نسبت به 24 ساعت بیشتر بود، مدت زمان 12 ساعت به عنوان زمان مناسب برای تیمار انتخاب شد. CSE در مدت زمان 12 ساعت به طور معناداری میزان فسفریلاسیون Akt وeNOS کاهش یافته توسط پالمیتات را افزایش داد. همچنین در مدت زمان 12 ساعت اندوتلین-1 که از محصولات مسیر MAPK می باشد توسط پالمیتات به طور معناداری کاهش و توسط CSE افزایش یافت.نتیجه گیری: : این تحقیق نشان داد که CSE در مدت زمان 12 ساعت اثرات سودمندی را در سلول HUVECs بر سیگنالینگ انسولین دارد و منجر به برقراری تعادل بین میزان نیتریک اکساید و اندوتلین-1 می شود.
پالمیتات
عصاره آبی بذر کاسنی
استرس اکسیداتیو
سلول HUVECs
، پدیدآور
عبدالهی پور حقیقی، راضیه
، استاد راهنما
نوروزی، آذین
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
ایران
20230508
1666ف
دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی
p
TF
92029
a
Y
