بررسی بیان فاکتور VIII خونی انسان در رده سلولهای تخمدان همستر چینی در بیوراکتور همزندار
[پایاننامه]
/مهدی شکیبایی
دانشگاه صنعتی سهند
، ۱۳۸۸
۱۵۹ ص۰
چاپی - الکترونیکی
کتابنامه در آخر پایان نامه
کارشناسی ارشد
مهندسی شیمی
دانشگاه صنعتی سهند
کشت سلولهای حیوانی به جهت تولید پروتئین های دارویی دارای اهمیت است۰ بهبود شرایط کشت مرحله مهمی از کشت سلولی میباشد۰ پارامترهای متفاوتی بر رشد و محصولدهی تاثیر خواهد گذاشت، مانند محیط کشت، غلظت سرم، محصولات جانبی سمی، اسمولاریتی و دما۰ در این پروژه اثر این پارامترها بر رشد و تولید فاکتور VIII بررسی شده است۰ به طور معمول، کشت سلولهای حیوانی در محیط کشتهای یکسان متداول صورت میگیرد۰ به هر حال مسیرهای متابولیسمی، شارهای متابولیکی، سرعت مصرف مواد مغذی و سرعت تولید متفاوت میباشد۰ پاسخها به شرایط محیطی، سطح مواد سمی و مواد مغذی میتواند متفاوت باشد۰ در این پروژه سلولهای تخمدان همستر چینی نوترکیب در محیط کشت پایه V/V) DMEM/Hams s F۱۲ ۱:۱) و سرم گاوی ۱۰ درصد کشت داده شدند۰ این سلولها به طور پیوسته فاکتور VIII انعقادی انسانی را بیان میکنند۰ افزایش اسمولاریتی و غلظت محصولات جانبی دانسیته سلولی را ۲۰ و ۳۰ درصد به ترتیب کاهش میدهد۰ آمونیوم و لاکتات دو محصول جانبی سمی در مسیرهای متابولیکی میباشند۰ تاثیر اسیدهای آمینه و پیشسازها بر رشد و تولید فاکتور VIII بررسی شده است۰ پرولین و گلایسین تنش ناشی از افزایش سطح آمونیوم را تسکین میدهند۰ دانسیته سلولی در حضور این دو اسید آمینه به ترتیب ۲۰ و ۲۵ درصد در مقایسه با کشت کنترل منفی ( حاوی ۱۰ میلی مولار آمونیوم و بدون اسید آمینه) افزایش مییابد۰ غلظت گلوکز دیگر پارامتری است که بر رشد و محصولدهی تاثیر مثبت خواهد داشت۰ افزودن پیشسازها به محیط کشت دانسیته سلولی را بیش از ۳۳ درصد افزایش میدهد۰ دانسیته سلولی به غلظت سرم وابسته بوده است۰ کاهش غلظت سرم رشد سلولی را مهار میکند۰ حذف سرم نیاز به افزودن مواد جایگزین دارد۰ در محیط کشت فاقد سرم با افزودن اسیدهای آمینه و بیوتین درصد سلولهای زنده بیش از ۱۸ درصد افزایش مییابد۰ در نهایت تاثیر دما بررسی شد۰ کاهش دما از ۳۷ به ۳۰ درجه سانتیگراد رشد سلولهای rCHO مهار کرده و مورفولوژی سلول رانیز تغییر میدهد۰ در نهایت با بررسی کلیه پارامترهای رشد و محصول دهی شرایط مناسب برای کشت در بیوراکتور انتخاب گردید۰ در کشت بیوراکتور مقدار بیان فاکتور VIII بررسی گردید۰ مقدار بیان سلولها در شرایط فرمانتور رضایت بخش بوده است۰
شکیبایی، مهدی
ابراهیمی، سیروس، استاد راهنما
تابنده، فاطمه، استاد راهنما
زمردیپور، علیرضا، استاد مشاور
ایران
20230909
شیمی،۲۰۱۴۵،۱۳۸۸
روتکاف نایب یسررب VIII رادنزمه روتکارویب رد ینیچ رتسمه نادمخت یاهلولس هدر رد ناسنا ینوخ.pdf