جداسازی و شناسایی ژنوتیپهای آکانتامبا از آبهای راکد شهر قزوین
[پایاننامه]
/بهرام حسن بیگی
[بی جا]
کاشان
، ۱۳۹۰
۷۹ص.
چاپی
کارشناسی ارشد
انگل شناسی
کاشان
سابقه و هدف: اکانتامبا آمیب آزادزی است که به عنوان فرصت طلب در مئارد اختلال ایمنی و عامل مهم کراتیت در استفاده کنندگان لنزهای تماسی شناخته شده است افزایش موارد اکانتامبیازیس در ده های اخیر سبب شده اشت که بررسی محیطی این نک یاخته مورد توجه قرار گیرد یکی از منابع مهم احتمالی آلودگی های انسانی ،ابهای راکد محیطی است.مطالعه حاضر به منظور جدا سازی و شناسایی ژنوتای های اکانتامبا در آبهای سطحی شهر قزوین انجام شد مواد و روشها: به طور کلی ۴۰ نمونه آب راکد از پارکها و میادین شهر قزوین جمع آوری شد نمونه ها از فیلترهای نیتروسلولز ۰/۴۵ میکرون عبور داده شدند عناصر باقی مانده روی فیلترها در محیط کشت آگار غیر مغذی کشت داده شدند محیطهای کشت از نظر تروفوزوئیت و کیست آکیب آزادزی به روش میکروسکوپی آزمایش شدند کشت های مثبت با استفاده از پرایمرهای اختصاصی جنس اکانتامبا به روش PCR مورد آزمایش قرار گرفتند وایزوله های مثبت از واکنش PCR جهت تعیین گونه وژنوتایپ تعیین ترادف شدند. یافته ها: به روش کشت در ۳۲ تا ۸۰درصد از نمونه ها آکیب آزادزی تشخیص داده شد به روش PCR در ۴۳/۸درصد ۱۴تا ۳۲ نمونه های مثبت ،اکانتامبا تشخیص داده شد که باندی حدود bp۵۰۰ نشان داد محصول PCR بدست آمده خالص سازی گردید و عمل سکوینسیگ انجام گرفت که نتایج آن به شرح ذیل می باشد با استفاده از نرم افزار choromas و آنالیز دادهای بدست آمده ۶۰درصد از نمونه های سکوائنسینگ شده Acanthamoeba SP و ۲۰درصد A.Palstinensis و ۲۰درصد A.Polyphaga بودند با مقایسه نتایج بدست آمده و داده های موجود در بانک جهانی ژن ۸۰درصد ژنوتیپ های شناسایی شده ژنوتیپ T۴ و ۲۰درصد نتایج ژنوتیپ T۲ بودند نتیجه گیری:اکانتامبا آمیب آزادزی شایعی در آبهای سطحی راکد شهر قزوین می باشد و ژنوتایپ T۴ به عنوان ژنوتایپ غالب در محیط مورد مطالعه شناخته شد لذا توجه پزشکان و دست اندکاران بهداشتی منطقه را به نقش احتمالی این آبها در انتقال اکانتامبا و بیماری ناشی ار آن توصیه می شود کلید واژه ها: اکانتامبا،آب راکد سطحی، جداسازی ، ژنوتایپ ،PCR